烟草中溴菌腈农药残留检测方法及消解动态

　　摘要：为摸清溴菌腈在烟草中的农药残留消解动态规律及残留特征，建立了QuEchERS前处理和气相色谱一串联质谱（GC-MS/MS）检测相结合的烟叶中溴菌腈残留量的分析方法。烟叶经乙腈提取，N-丙基乙二胺吸附剂（PSA）净化，气相色谱一串联质谱法检测。结果表明，在0.01-1.0mg/kg 3个添加水平下，溴菌腈在鲜烟叶和干烟叶中的平均回收率分别为85.8%-94.5%、83.2%-110.0%，相对标准偏差（RSD）分别为1.4%-10.6%、7.3%-14.1%，定量限（LOQ）均为0.01mg/kg。利用山东和湖南2年2地的溴菌腈在烟叶中农药残留田间试验样品进行了深入研究，溴菌腈在烟叶中的半衰期7.8-14.9d；按照162g.a.j./h㎡和243g.a.j./h㎡剂量，分别灌根施药1-2次，末次施药14d后，溴菌腈在烟叶样品中的最终残留量为0.010-0.13mg/kg。根据烟草青枯病发病条件、发病时期、农药在烟叶中使用情况及OECD农药残留限量计算结果，建议溴菌腈在烟叶中残留限量为0.2mg/kg，安全间隔期为14d。
　　关键词：溴菌腈；烟草；残留；QuEChERS；气相色谱一串联质谱
　　中图分类号：S345.72
　　文章编号：1007-5119（2016）01-0067-05
　　DOI：10.13496/j.issn.1007-5119.2016.01.012
　　溴菌腈（bromothalonil）是一种广谱、高效、低毒的内吸性杀菌剂，能抑制和铲除真菌、细菌、藻类的生长，对农作物多种真菌性、细菌性病害以及烟草青枯病具有较好的防治效果。研究溴菌腈在烟草中的农药残留消解动态及残留特征，可以为制定溴菌腈在烟草上的合理用量和残留限量提供科学依据。刘伟等、刘慧群建立了气相色谱法检测溴菌腈在苹果、黄瓜及土壤中残留量方法并研究了残留降解规律。目前，国内外尚无该农药在烟草上降解规律和残留特征的研究报道。近年来，QuEChERS技术作为液液萃取和固相萃取的替代前处理方法，已经成功应用于多种有机物的提取和净化，在烟叶农药残留的前处理过程中的应用也较为广泛。本研究建立了QuEChERS提取净化，GC-MS/MS检测烟草中溴菌腈农药残留量的方法，并对山东和湖南GAP试验条件下，烟叶中溴菌腈农药残留量和消解动态进行了检测和研究，对该农药安全使用提出建议。
　　1 材料与方法
　　1.1 主要仪器与试剂
　　气相色谱一串联三重四极杆质谱（TSQQUANTUM XLS，德国Thermo fisher公司）；千分之一电子天平（SHIMADZU-UW 420H，日本Shimadzu公司）；万分之一电子天平（ER-182 A，日本Tykyo公司））；超声波振荡机（RSQ-60 AS，宁波荣顺）；回旋式振荡器（BLUD PARD WS2-200A，上海蓝豹）；旋转蒸发仪（HEIDOLPH-ADVANTAGE，德国海道尔夫）。
　　95%溴菌腈标准品（美国Sigma-Aldrich公司）25%溴菌腈·壬菌铜微乳剂（溴菌腈含量为20%，潍坊万胜生物农药有限公司）；乙腈（色谱纯，gg.g%，德国默克股份两合公司）；丙酮（99.5%，烟台三和化学试剂有限公司）；无水硫酸镁（98.0%国药集团化学试剂有限公司）；氯化钠（99.5%，西陇化工股份有限公司）；柠檬酸钠（99.0%，国药集团化学试剂有限公司）；柠檬酸氢二钠（99.0%国药集团化学试剂有限公司）；N-丙基乙二胺吸附剂（99.5%，天津市天兴达科技有限公司）。
　　1.2 田间试验
　　分别于2012-2013年在山东青岛（土壤为砂性棕壤，pH值为6.4，有机质含量1.7g%，中等肥力）、湖南长沙（土壤为红壤，pH为5.9，有机质含量1.56%，中等肥力）进行了田间试验，供试烟草品种为NC89（山东）和云烟87（湖南），整个田间生产过程符合当地GAP生产要求。试验农药为25%溴菌腈-壬菌铜微乳剂（溴菌腈含量为20%）。农药登记资料显示，该农药防治烟草青枯病，总用量为112.5-202.5g.a.j./h㎡（溴菌腈用量90-162g.a.j./h㎡），施药方式为灌根，次数为1次。按《农药残留试验准则》要求，设置243g.a.j./h㎡1次施药，243g.a.j./h㎡2次施药，162g.a.i./h㎡1次施药，162ga.j./h㎡2次施药共4个最终残留量试验及1个消解动态试验，合计5个处理区。每小区面积30㎡，重复3次，随机排列，小区间设保护带，另设对照小区。
　　1.2.1 农药残留消解动态试验旺长后期施药，按照溴菌腈用量243g.a.j./h㎡，用水量900L/h㎡，叶面均匀喷雾。施药后th，l、3、5、7、14、21、28、35、42d采样。在试验小区内随机采集l kg生长正常、无病害烟叶，切碎、混匀，四分法留样200g，-20℃保存，待测。
　　1.2.2 烟叶最终残留量试验4个处理区灌根施药，每株药液量50mL，最后一次施药后7、14、2ld，随机采集烟叶样品不少于100片，三段式烘烤工艺烘烤，粉碎、缩分后取200g，-20℃保存。
　　1.3 分析方法
　　1.3.1 样品的提取与净化提取：称取鲜烟叶样品5.0g（或干烟叶样品2.0g，加2mL蒸馏水，轻摇使样品润湿，静置5min）于50mL具盖离心管中，加入10mL乙腈，于漩涡混合振荡器上振荡提取lniin，加入4g无水硫酸镁，Ig氯化钠，Ig柠檬酸钠和0.5g柠檬酸氢二钠，立即于漩涡混合振荡仪振荡2min，防止无水硫酸镁结块，然后以4000r/min离心10min。净化：移取1.5mL上清液于2mL离心管中，加入150mg无水硫酸镁和25mg N-丙基乙二胺键合固相吸附剂，于漩涡混合振荡仪上漩涡振荡2min，以13000r/min离心5min，吸取上清液1.0mL，浓缩近干，加入lmL正己烷/丙酮（V∶V， 7：3）溶解，待测。

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