黔产苗药对坐叶药材HPLC指纹图谱研究

　　中图分类号 R284 文獻标志码 A 文章编号 1001-0408（2019）02-0232-04
　　DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2019.02.18
　　摘 要 目的：建立黔产苗药对坐叶药材的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱。方法：采用HPLC法。色谱柱为Agilent Eclipse XDB C18，流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为235 nm，柱温为25 ℃，进样量为15 ?L。以芦丁为参照，测定10批贵州不同地区对坐叶药材的HPLC图谱，采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》（2004A版）进行共有峰指认和相似度评价。结果：10批对坐叶药材的HPLC指纹图谱有12个共有峰，相似度均大于0.90。经验证，10批样品HPLC图谱与对照指纹图谱具有较好的一致性。结论：本研究所建HPLC指纹图谱可为对坐叶药材的鉴别和质量评价提供参考。
　　关键词 黔产苗药；对坐叶；高效液相色谱法；指纹图谱
　　ABSTRACT OBJECTIVE： To establish HPLC fingerprint of Miao medicine Hedyotis uncinella from Guizhou. METHODS： HPLC method was adopted. The determination was performed on Agilent Eclipse XDB C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.2% phosphoric acid （gradient elution） at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 235 nm， and column temperature was 25 ℃. The sample size was 15 ?L. Using rutin as reference， HPLC chromatograms of 10 batches of H. uncinella from different areas of Guizhou province were determined. Similarity Evaluation System for TCM Chromatographic Fingerprints （2004A edition） was used to identify common peaks and evaluate similarity. RESULTS： There were 12 common peaks in HPLC fingerprints of 10 batches of H. uncinella， and the similarity was higher than 0.90. After validation， HPLC chromatograms of 10 batches of sample were in agreement with control fingerprints. CONCLUSIONS： Established HPLC fingerprints can provide reference for the identification and quality evaluation of H. uncinella.
　　KEYWORDS Miao medicine from Guizhou； Hedyotis uncinella； HPLC； Fingerprint
　　苗药对坐叶为茜草科植物对坐叶（Hedyotis uncinella Hook. et Arn.）的干燥全草，为贵州苗药。对坐叶味辛、微苦，性平，具有清热解毒、调中止泻的功效，可用于治疗腹泻、腹胀、腹痛、里急后重以及痢疾、急性胃炎。苗药解毒止泻胶囊，由苗药对坐叶为主药组成中药复方制剂。目前该产品主要在遵义家诚药业生产，苗药解毒止泻胶囊用于胃肠湿热所致的腹泻、腹胀、腹痛、急性肠炎等症状，作为地方药材标准被收载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》（2003年版）[1]。现行标准仅通过性状、显微、薄层对对坐叶药材进行质量控制。本文对对坐叶药材进行高效液相色谱（HPLC）指纹图谱研究，并对10批不同产地来源对坐叶药材进行了相似度评价比较，建立HPLC指纹图共有模式，以期为对坐叶药材的质量控制和有效识别提供参考。
　　1 材料
　　1.1 仪器
　　LC-1260型HPLC仪，包括四元泵、二极管阵列检测器、柱温箱、自动进样器、Agilent 1260工作站（美国Agilent 公司）；AB204-S型电子分析天平（瑞士Mettler-Toledo公司）；KQ-500DV型数控超声波清洗机（功率：500 W，频率：60 kHz，昆山市超声仪器有限公司）；111型中药粉碎机（上海海久中药机械制造有限公司）。
　　1.2 药材、药品与试剂
　　对坐叶药材采集于贵州各地区，经遵义医药高等专科学校刘亮副教授鉴定为茜草科植物对坐叶（Hedyotis uncinella Hook.et Arn.）的干燥全草。药材来源及信息见表1。芦丁对照品（批号：100080-200707，纯度：100%，购于中国食品药品检定研究院）；乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯，水为纯水。
　　2 方法与结果
　　2.1 色谱条件
　　色谱柱：Agilent Eclipse XDB C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈（A）-0.2%磷酸溶液（B），梯度洗脱（0～5 min，5%A→10%A；5～15 min，10%A→15%A；15～25 min，15%A→20%A；25～35 min，20%A→30%A；35～40 min，30%A→5%A；40～45 min，5%A）；流速：1.0 mL/min；柱温：25 ℃；检测波长：235 nm；进样量为15 μL；运行时间：45 min[2-6]。

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