茶叶浸提液对小鼠学习记忆能力影响的初步研究

　　摘 要：茶对人体具有降三高、减肥、提神、防老年痴呆症等功效。然而学校大多数同学在口渴的情况下选择喝茶叶水人数比例只占12.3%。因此，研究喝茶可能提高记忆能力、饮茶是否对青少年智力发展具有帮助具有意义。本文通过3项实验，分别分析了不同配比的茶叶浸提液中茶多酚的含量测定，不同加工方式的茶叶浸提液对小鼠学习记忆能力的影响，不同浓度的茶叶浸提液对小鼠学习记忆能力的影响，最终喝茶对青少年智力发展具有一定作用的结论。
　　关键词：茶叶浸提液；小鼠；学习；记忆能力；影响
　　中图分类号：R944.26 文献标识码：A DOI：10.11974/nyyjs.20160832075
　　绪论
　　资料[1-2]表明，长期饮用碳酸饮料容易引起肥胖、糖尿病、骨质疏松等症。通过调查问卷方式了解到在口渴情况下大多数同学是喝白开水，喝茶叶水（简称喝茶）比例只有12.3%。茶，是中华民族的举国之饮，中国几千年的饮茶史，足以证明饮茶的重要性。有资料[3]表明，茶叶中有益的成份主要是茶多酚和茶多糖，喝茶对人体有许多益处：如降血糖、降血压、降血脂，可减肥、提神等，还可以防老年痴呆症。
　　老年痴呆症的症状之一是渐进式记忆障碍，而记忆能力是智力的重要组成，对学习能力影响非常大。青少年时期是一个人智力发展的高峰期，在国家提倡大健康的背景下，饮茶能否对青少年智力发展提供有益的帮助，这是值得研究的问题。通过查阅文献，相关研究资料很少。因此决定建立“茶叶浸提液对小鼠学习记忆能力影响的初步研究”课题，对该问题进行研究。
　　1 材料和方法
　　课题组从2015年9月—2016年2月，利用课余、节假日，进行了以下3项实验研究，分别是不同配比的茶叶浸提液中茶多酚含量的测定、不同加工方式的茶叶浸提液对小鼠学习记忆能力的影响、不同浓度的茶叶浸提液对小鼠学习记忆能力的影响。
　　1.1 实验1
　　不同配比的茶叶浸提液中茶多酚含量的测定
　　1.1.1 实验材料
　　本实验材料采用按制造工艺分类的茶叶，即红茶和绿茶，采用市场上常见的品牌和产地茶叶。实验使用的绿茶为一级的龙井茶，产地是浙江杭州钱塘产区，产品标准号为GB/T18650 ，厂商是杭州忆江南茶业有限公司；红茶则为一级大红袍，原料产地为云南临沧，而产地则是福建漳州，产品标准号为GB/T13738.2，厂商是漳州天福茶业有限公司。另外，本次实验还用到了购买于上海金穗生物科技有限公司的茶多酚标准品（含量≥98%）、 KMnO4溶液、3moL/L H2SO4溶液、邻二氮菲亚铁指示剂（0.025moL/L）等。
　　1.1.2 实验样品配置
　　茶叶浸提液配比时，统一使用75mL的沸水，通过控制茶叶的重量来提取不同浓度的茶叶浸提取液。具体是分别将0.75g、0.83g、0.94g、1.07g、1.25g、1.50g、1.88克、2.50g、3.75g、7.50g的茶叶放入75mL的沸水中浸泡10min，得到配比为1：100、1：90、1：80、1：70、1：60、1：50、1：40、1：30、1：20、1：10的浸提液。
　　1.1.3 实验方法
　　在本次实验中主要采用的是高锰酸钾滴定法[5]，用于测定各样品中茶多酚的含量。
　　1.2 实验2
　　不同加工方式的茶叶浸提液对小鼠学习记忆能力的影响
　　1.2.1 实验材料
　　本次实验使用的动物是ICR雄性小鼠，鼠龄3周（浙江省医学科学院实验动物中心购得，许可证号：scxk（浙）2008-0033），饲料是由浙江省实验动物饲料生产基地、浙江省实验动物中心共同制造的，执行标准为GB14924-2001。另外，垫料是经121℃、30min高压蒸汽灭菌木质刨花，浙江省医学科学院实验动物中心购得，绿茶和红茶与实验一的相同。
　　1.2.2 实验分组
　　实验分为3组，分别为：对照1组——小鼠11只，饮用水为去氯自来水（存放24h后自来水）；绿茶组——小鼠15只，饮用水为配比1：30的绿茶浸提液；红茶组——小鼠15只，饮用水为配比1：30的红茶浸提液。3组小鼠其它生活条件相同。根据文献[4]和人们的喝茶习惯，本实验采用配比为1：30的茶叶浸提液。
　　1.2.3 实验方法
　　1.2.3.1 观察法
　　观察法主要指的是在学校实验室，小鼠自由摄食，饮水，饲养观察35d，每天观察小鼠活动情况，记录小鼠饮水量，摄食量，每周称量小鼠体重。
　　1.2.3.2 Morris水迷宫实验
　　在饲养35d后，小鼠在水迷宫实验室适应3d，进行Morris水迷宫实验。实验分为“定位航行”和“空间搜索”2部分，定位航行实验4d，每天记录小鼠潜伏期；空间搜索实验1d，记录小鼠穿越平台次数和Ⅰ象限的时间，通过这些数据来测试小鼠的学习记忆能力。
　　1.2.3.3 生化指标检测
　　水迷宫实验结束后，解剖小鼠，提取脑组织，检测脑组织丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）的活性。主要包括MDA含量测定和SOD活性测定，其中MDA含量测定主要采用的是硫代巴比妥酸（TBA）法[6]，操作步骤按MDA测定试剂盒说明操作，而SOD活性测定则是采用WST-1法[7]，按SOD测试盒说明操作。
　　1.3 实验3
　　不同浓度的茶叶浸提液对小鼠学习记忆能力的影响
　　1.3.1 实验材料
　　本实验采用的实验材料与实验二的相同
　　1.3.2 实验分组为
　　对照2组——10只，饮用水为去氯自来水（存放24h后自来水）；绿茶组（1：10）——10只，饮用水为配比1：10的绿茶浸提液；绿茶组（1：30）——10只，饮用水为配比1：30的绿茶浸提液；绿茶组（1：100）——10只，饮用水为配比1：100的绿茶浸提液；红茶组（1：10）——10只，饮用水为配比1：10的红茶浸提液；红茶组（1：30）——10只，饮用水为配比1：30的红茶浸提液；红茶组（1：100）——10只，饮用水为配比1：100的红茶浸提液。

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