博落回药材的提取工艺研究

　　[摘要] 目的：研究博落回药材的提取工艺。方法：采用正交试验法，以白屈菜红碱得率及固形物为指标，考察乙醇浓度(Ａ)、提取温度(Ｂ)、pH值(Ｃ)三个因素对博落回提取工艺的影响。结果：优化的博落回提取工艺为A2B1C2，即取博落回药材以80%乙醇、调节pH=5.0、60℃温浸提取。结论：本研究确定的最佳工艺可行。
　　[关键词] 博落回；提取工艺；正交试验；白屈菜红碱
　　[中图分类号] R284[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2008）07（a）-011-03
　　
　　Study on the extraction process of Macleaya cordata(Willd.)R.Br.
　　LI Hui1，XIAO Jia-shang2
　　（1.The Sixth Branch Institute for Drug Control of Guangzhou, Guangzhou 510800, China; 2.The Third Branch Institute for Drug Control of Guangzhou, Guangzhou 510700, China)
　　[Abstract] Objective: To optimize the extraction process of Macleaya cordata(Willd.)R.Br..Methods: The study was carried out through orthogonal experimental designed with chelerythrine as the guide,3 influence factors including alcohol concentration, extraction temperature and pH. Results: The optimal conditions for the extraction were A2B1C2,extracted with 80% alcohol (pH=5.0) at 60℃.Conclusion:The optimal process is proved to be feasible.
　　[Key words] Macleaya cordata(Willd.)R.Br.; Extraction process; Orthogonal experimental design; Chelerythrine
　　
　　博落回为罂粟科博落回属植物博落回Macleaya cordata (Willd.)R.Br.的果实。现代研究表明，博落回果实中主要含生物碱成分，目前分得多种生物碱[1,2]：白屈菜红碱（chelerythrine）、血根碱（sanguinarine）、原阿片碱（protopine）等。实验证明，博落回中生物碱对KB、P388、W256型肿瘤细胞有抑制作用，白屈菜红碱有止咳、平喘、镇痛作用，血根碱能抑制胆碱酯酶活性，还能加强心脏活动、刺激唾液分泌，并具有利尿、外周抗肾上腺素解交感作用。
　　提取博落回生物碱的方法较多，有乙醇提取法[3]，大孔树脂分离法[4]，酸水提取法等，但这些方法提取物中生物碱含量较低，纯化操作过程烦琐。本实验以酸性乙醇（pH=5.0）提取，以白屈菜红碱的转移率及固形物为考察指标，考察乙醇浓度(Ａ)、提取温度(Ｂ)、pH值(Ｃ)三个因素对博落回提取工艺的影响，为中药博落回药材的提取提供科学依据。
　　1实验部分
　　1.1 仪器与试药
　　高效液相色谱仪(Waters 600E泵，717自动进样器，Waters M32色谱工作站)；Shimadzu Libror AEL 40SM天平(日本岛津)；SYZ-A石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏信达仪器厂)。磷酸(分析纯，南京化学试剂厂)； 乙腈(色谱纯，Tedia Company, Inc., Fairfield, OH,USA)。白屈菜红碱(C21H18NO4)对照品(Sigma公司)。博落回药材为市售。
　　1.2 白屈菜红碱含量测定方法
　　1.2.1 色谱条件Diamonsil C18色谱柱(迪马公司)( 4.6 mm×250 mm，5 μm)，乙腈-0.2%磷酸（20∶80）为流动相，检测波长为268 nm，流速1.0 ml/min，柱温30℃。理论塔板数以白屈菜红碱峰计算不低于3 000。
　　1.2.2 对照品溶液的制备精密称取白屈菜红碱对照品适量，加甲醇制成每1 ml含0.1 mg的溶液，摇匀，作为对照品溶液。
　　1.2.3 供试品溶液的制备取博落回粗颗粒100 g，共9份，分别按表3中正交试验条件提取，收集各次醇提液，回收乙醇，残渣加甲醇溶解并转移至100 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，精密量取1 ml，置50 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
　　1.2.4 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μl，注入液相色谱仪，测定，计算，计算白屈菜红碱得率。
　　1.3 提取溶剂的选择
　　博落回主要活性成分白屈菜红碱醇溶性较好，可以用一定浓度的乙醇提取，酸化有利于生物碱的浸出，故实验计划选用酸化的80%乙醇提取。又因为白屈菜红碱是季铵碱，有强的碱性，能溶于酸水中，因此也可以用酸水提取。下面通过实验比较两种方法的优劣。
　　1.3.1 操作方法准确称取干燥博落回果实(白屈菜红碱含量为0.57%)2份，每份100 g，样品号分别为1和2。样品1用酸性80%乙醇（pH=5.0）提取3次。第1次用12倍量于搅拌下温浸（60℃）3 h，倾出上层清液。药渣第2次加入10倍量于搅拌下温浸（60℃）2 h，倾出上层清液。药渣第3次加入8倍量于搅拌下温浸（60℃）2 h，倾出上层清液。合并3次酸醇提取液，以HPLC测定白屈菜红碱的浓度。
　　样品2用酸水（pH=5.0）温浸提取3次，与上述酸乙醇提取以每次同样的体积，同样的条件，同样的操作作平行对比。合并3次提取液，HPLC法测定白屈菜红碱的浓度。
　　1.3.2 结果与讨论测定两组实验提取液体积和白屈菜红碱的浓度，计算白屈菜红碱的量，并计算提取率。取提取液20 ml置蒸发皿中蒸干，真空干燥称重。计算每种提取方法总的所得固形物的量。结果见表1。
　　
　　由表1可知，酸性乙醇的提取率（91.9%）高于酸水提取率（83.5%），并且酸性乙醇提取所得固形物量低于酸水提取。因此我们综合考虑提取率、所得固形物的量，优选酸性乙醇提取的方法。下面进一步优化酸性乙醇提取的条件。
　　1.4 提取工艺的选择
　　1.4.1 正交试验设计在预实验中我们发现，影响提取效果的的主要因素有乙醇浓度、提取温度、溶剂的pH值。现就此三方面因素，各设立3个水平，以白屈菜红碱的转移率和所得固形物为考察指标，每个因素各取3个水平以正交表L9(34)进行三因素三水平的正交试验（表2）。
　　
　　1.4.2 样品的制备精密称取干燥博落回果实9份，每份100 g。按表2中正交试验条件分别提取3次。第1次12倍量3 h，第2次10倍量2 h，第3次8倍量2 h。合并3次酸醇提取液，以HPLC测定白屈菜红碱的浓度。每个试验提取液精密量取20 ml，蒸干，真空干燥，称重，计算所得固形物量。

相关热词搜索：药材 提取 工艺 研究 博落回