HPLC同时测定苦参药材中5种生物碱含量

　　摘要：目的 使用高效液相色谱法测定不同产地苦参药材中槐果碱、苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱、氧化苦参碱的含量。方法 使用Agilent ZORBAX NH2（4.6 mm×150 mm，5 ?m）色谱柱，流动相为乙腈-无水乙醇-3%磷酸溶液（84∶10∶6），流速为1 mL/min，检测波长为210 nm。结果 槐果碱在0.022 88～0.114 4 ?g（r=0.999 7）、苦参碱在0.0832～0.416 0 ?g（r=0.999 7）、氧化槐果碱在0.376 2～1.836 0 ?g（r=0.999 8）、槐定碱在0.104 4～0.522 ?g（r=0.9992）、氧化苦参碱在0.491 2～2.456 ?g（r=0.999 9）范围呈良好的线性关系，加样回收率分别为101.63%（RSD=2.08%）、98.29%（RSD=1.87%）、101.89%（RSD=1.97%）、99.87%（RSD=2.06%）、102.66%（RSD=1.34%）。结论 该方法简便、灵敏、准确，可用于苦参药材的质量控制。
　　关键词：苦参；含量测定；槐果碱；苦参碱；氧化槐果碱；槐定碱；氧化苦参碱；高效液相色谱法
　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.09.021
　　中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）09-0061-02
　　Determination of Five Kinds of Alkaloids in Sophorae Flavescentis Radix by HPLC LV Jia， WANG Dan， ZHANG Zhen-qiu， YUAN Zi-min， LIU Yu-qiang （Liaoning University of TCM， Dalian 116600， China）
　　Abstract：Objective To determine the content of sophocarpine， matrine， oxysophocarpine， sophoridine， oxymatrine in Sophora Flavescentis Radix from different areas. Methods Agilent ZORBAX NH2 column （4.6 mm×150 mm， 5 ?m） was used with mobile phase of acetonitrile-ethanol-3% phosphate （84∶10∶6）， at a flow rate of 1 mL/min. The wavelength of detection was 210 nm. Results The linear range of sophocarpine， matrine， oxysophocarpine， sophoridine and oxymatrine were 0.022 88-0.114 4 ?g （r=0.9997）， 0.083 2-0.416 0 ?g （r=0.999 7）， 0.376 2-1.836 0 ?g （r=0.999 8）， 0.104 4-0.522 ?g （r=0.999 2）， 0.491 2-2.456 ?g （r=0.999 9）， respectively. The average recovery were 101.63% （RSD=2.08%）， 98.29% （RSD=1.87%）， 101.89% （RSD=1.97%）， 99.87% （RSD=2.06%）， 102.66% （RSD=1.34%）， respectively. Conclusion The method is simple， rapid and accurate， and suitable for the quality control of Sophorae Flavescentis Radix.
　　Key words：Sophorae Flavescentis Radix；determination；sophocarpine；matrine；oxysophocarpine；sophoridine；oxymatrine；HPLC
　　苦参药材为豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根，具有清热燥湿、杀虫、利尿的功效[1]。苦参中所含生物碱类成分具有广泛的生物活性，如抗肿瘤、抗肝损伤、抗心律失常及抗柯萨奇B病毒等[2-4]。其中槐果碱、苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱、氧化苦参碱为苦参中含量较大的生物碱。2010年版《中华人民共和国药典》（一部）中采用高效液相色谱法（HPLC）对苦参碱和氧化苦参碱的含量进行测定，也有文献报道对苦参药材中多种生物碱含量进行研究，多采用梯度洗脱测定[5-6]。
　　本研究采用HPLC（固定流动相比例）对不同产地的苦参药材中槐果碱、苦参碱、氧化槐果碱、槐定碱、氧化苦参碱的含量进行测定，以控制苦参药材的质量。
　　1 仪器与试药
　　Agilent 1100高效液相色谱仪（美国惠普公司），Agilent chemstation色谱工作站；KQ-500DE型超声波清洗器（昆山超
　　基金项目：大连市科学技术基金（2008J21JH007）
　　通讯作者：张振秋，Tel：0411-87586058
　　声仪器有限公司）。
　　苦参药材分别采自内蒙古、黑龙江、河北、辽宁、吉林，经辽宁中医药大学李峰教授鉴定为豆科槐属植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根；槐果碱对照品由成都曼斯特生物技术有限公司提供，纯度为99.2%；苦参碱对照品（批号110805-200306）、氧化槐果碱对照品（批号111652-200301）、槐定碱对照品（批号110784-200303）、氧化苦参碱对照品（批号110780-200004购自中国药品生物制品检定所，供含量测定用；乙腈、无水乙醇为色谱纯，水为二次蒸馏水，其余试剂为分析纯。

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