离子色谱法测定烟叶中游离氨基酸

　　摘要：为了研究离子色谱法测定烟叶中游离氨基酸含量，以游离氨基酸测定总量为指标，考察了萃取所用的溶剂、温度、时间以及料液比等因素对游离氨基酸测定量的影响。结果表明，烟草中游离氨基酸的最优检测条件为：萃取溶剂为0.1 mol/L盐酸、萃取时间为30 min、萃取温度为30 ℃、烟叶与盐酸的比例为1∶40（w/v）。测定方法的氨基酸检出限为2.76～22.36 ng/mL，定量限为9.57～102.13 ng/mL，试验的RSD为1.26%～4.96%，氨基酸的加标回收率为83.51%～106.78%，说明该优化方法可行，利用确定的最佳条件测定了国内主产区的10种烤烟型烟叶。
　　关键词：烟草;游离氨基酸;离子色谱;测定
　　中图分类号：O656.3        文献标识码：A        文章编号：0439-8114（2015）23-6023-03
　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.23.058
　　Determination of Free Amino Acids in Tobacco by Ion Chromatography Method
　　LI Hui1，YUE Xian-ling1，LI Hao2，HOU Peng-juan2，ZHANG Jun-song2
　　（1.Technology Center of Heilongjiang Tobacco Industry Co.，Ltd.， Harbin 150001， China;
　　2.College of Food and Bioengineering Zhengzhou University of Light Industry， Zhengzhou 450002， China）
　　Abstract： In order to study the effect of ion chromatography method for the determination of free amino acids in tobacco， the optimization of the experimental conditions were studied， the value of free amino acids used as a response value. The experimental results showed that the best experimental conditions were as follows： the extract solvent was 0.1 mol/L hydrochloric acid; the temperature of experiment was 30 ℃; the extract time was 30 min; the solid to liquid ratio was 1∶40（w/v）. The detection limit of the method was 2.76～22.36 ng/mL，limit of quantitation was 9.57～102.13 ng/mL， the method has high recovery（83.51%～106.78%）and good repeatability （RSD<5%）， these results demonstrate that this method is feasible. The contents of free amino acids in 10 flue-cured tobaccos were determined.
　　Key words：tobacco;free amino acids;ion chromatography;determination
　　游离氨基酸是烟草中的一类重要化合物，约占烟叶重量的0.5%～2.1%[1]，在烟草生长、烘烤、陈化、工艺加工以及燃烧的过程中参与化学反应，并生成许多种具有不同香味特征的化合物，与烟叶内或外加的还原糖发生缩合以及缩合物的进一步降解，生成一系列的吡咯、吡嗪和呋喃类等碱性香味化合物，这些碱性香味成分对烟草的香气、吸味等感官质量产生显著影响[2，3]。某些氨基酸也可以自身分解，生成具有香味的化合物，因此烟叶中游离氨基酸的种类数量以及烟叶中各种氨基酸的含量的多少与烟叶品质的好坏有着重要的相关性[4，5]。
　　研究发现，烟叶中适量的氨基酸可有助于提高相应卷烟烟气劲头以及增加其烟气的丰满度，但是若烟叶中氨基酸含量过于偏高，会使相应卷烟烟气产生过于辛辣的口感，并且味苦、刺激性强烈，含量过低则会使烟气趋于平淡无味，丰满程度变差，因此烟草中氨基酸含量的多少对其感官质量有重要的影响[6-8]。为此利用离子色谱测定烟草中游离氨基酸，以期为卷烟工业合理利用烟叶原料提供科学依据。
　　1  材料与方法
　　1.1  材料与仪器
　　试验所用烟叶均为黑龙江烟草工业有限责任公司技术中心提供;17种氨基酸标样（>99%，百灵威公司）;无水醋酸钠（>99.9%， Dionex公司）;氢氧化钠和氨水（AR，中国医药集团上海化学试剂公司）;37%盐酸（ACROS公司）;SPE SCX 4 mL/200 mg强阳离子交换固相萃取小柱;0.45 μm水相滤膜（津腾）。
　　HZ-F185型旋转恒温震荡器（太仓试验设备厂）;ICS-5000+型分析型多功能离子色谱（美国戴安公司）;RE-52AA型旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂）。
　　1.2  试验方法

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