高效液相色谱法同时测定人参药材中的6种人参皂苷含量

发布时间:2019-08-30 来源: 感悟爱情 点击:

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  摘 要 目的:参照全球主要国家药典的相关内容,应用高效液相色谱法建立更趋简便、实用的人参皂苷含量测定方法。方法:采用ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5.0 μm);流动相为0.025%磷酸溶液-乙腈,梯度洗脱;流速0.9 ml/min;检测波长203 nm。对10批市售人参药材中的6种人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2和Rd的含量进行测定。结果:可同时测定6种人参皂苷含量。10批市售人参药材中的6种人参皂苷含量的差异较大。结论:本方法专属性强,且测定结果准确、可靠,可用作人参药材质量标准中人参皂苷含量的测定方法。
  关键词 人参 人参皂苷 高效液相色谱法 含量测定
  中图分类号:R927.2; R284.1 文献标志码:A 文章编号:1006-1533(2018)13-0072-04
  SHANG Xiaohui**, ZHU Ya’nan, YE Guan***
  (Central Research Institute, Shanghai Pharmaceuticals Holding Co., Ltd., Shanghai 201203, China)
  ABSTRACT Objective: To establish an HPLC method for the determination of six ginsenosides on the basis of ChP 2015, USP38-NF33, EP8.0, BP 2013 and JP17. Methods: The contents of six ginsenosides in ten samples sold in market were determined by HPLC on a ZORBAX Eclipse Plus C18 column (4.6 mm × 250 mm, 5.0 mm) with a mobile phase of acetonitrile-0.025% of phosphoric acid solution (adjusted to pH 2 with phosphoric acid) at the flow rate of 0.9 ml/min and the detected UV wavelength of 203 nm. Results: The contents of six ginsenosides including Rg1, Re, Rf, Rb1, Rb2 and Rd in the ten samples could be simultaneously determined and there were significant differences among them. Conclusion: This method is simple, rapid and repeatable with good specificity, so it can be used for quality control of Panax ginseng.
  KEY WORDS Panax ginseng; ginsenosides; HPLC; content determination
  人参(Panax ginseng C. A. Mey.)为五加科植物人参的干燥的根和根茎,具有“百草之王”的美誉,具有补益脾肺、生津养血、安神益智等多种功效[1],多用于大补元气。现代药理研究表明,人参由于其多成分、多靶点的作用,具有改善心血管循环、提高免疫力、延缓衰老和抗肿瘤等多种药理活性[2-5]。
  人参具有较高的保健、药用价值,在全球范围内得到了广泛应用。目前,全球主要国家药典中均收载有人参药材的质量标准,且多以人参皂苷Rg1、Rb1和Re的含量为指标进行质量控制。
  为了更好地控制人参药材质量,笔者等在参照各主要国家药典相关内容、特别是《2015美国药典-国家处方集》中西洋参质量标准的基础上,应用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography, HPLC)建立了可同时测定人参药材中6种主要人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2和Rd含量的新方法,为人参药材企业内控标准的建立提供了依据。
  1 仪器与试药
  Agilent 1260高效液相色谱系统(美国Agilent公司生产);乙腈(色谱纯)、磷酸(分析纯)、水(超纯水)。
  10批市售人参药材(经笔者之一叶冠鉴定为人参的干燥根,样品保存在笔者所在研究院的样本库中)。
  对照品人参皂苷Rg1(批号:110703-201230)、Re(批号:110754-201525)、Rf(批号:111719-201505)、Rb1(批号:110704-201424)、Rb2(批号:111715-201203)和Rd(批号:111818-201302)均购自中国食品药品检定研究院。
  2 方法及结果
  2.1 对照品溶液制备
  精密称取适量人参皂苷Rg1、Re、Rf、Rb1、Rb2和Rd,甲醇定容后得浓度分别为2 620、2 250、1 200、3 340、1 610和1 420 μg/ml的对照品溶液,备用。
  2.2 供试品溶液制备
  方法1:取供试品粉末(过4号筛)约3 g,精密称定后溶于150 ml三氯甲烷中,采用索氏提取法加热回流3 h,弃三氯甲烷液,殘渣待溶剂挥发后移入250 ml锥形瓶中,加150 ml水饱和正丁醇,超声处理90 min,过滤。取滤液125 ml,蒸干,残渣以甲醇溶解并移至25 ml量瓶中,定容,摇匀,过滤,即得供试品溶液。

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