西双版纳产儿茶药材儿茶素含量的测定

　　摘　要：目的：测定云南西双版纳产儿茶药材中儿茶素的含量。方法：采用反相高效液相色谱法，以儿茶素为对照品。结果：按选定的色谱条件，儿茶素在0．6125～9．8μg范围内线性良好，加样回收率为99．6％，RSD为1．8％(n＝5)；儿茶样品检测含量在14．95～15．84％范围内。结论：云南西双版纳产儿茶药材儿茶素含量在15．37％左右，有很高的药用价值和经济价值。
　　关键词：儿茶素；反相高效液相色谱法；西双版纳
　　中图分类号：R927．2　文献标识码：A
　　文章编号：1007—2349(2007)02—0037－02
　　儿茶以豆科植物儿茶树Acacia catechu(L)Willd去皮后的心材煎汁浓缩而成的干燥浸膏入药。儿茶为云南特产的“南药”，是我国民族药中最早收载《中国药典》的正品中药之一。也是我国历史上有记载的进口“南药”品种之一。《中国药典》^[1]收载儿茶的功能是收湿生肌敛疮。主治溃疡不敛，湿疹，口疮，跌打伤痛，外伤出血。儿茶素类化合物具有明显的清除体内自由基、阻断N－亚硝基化合物形成、抑制脂氧化酶活性和脂质过氧化物作用，并有防突变、防癌等药理活性。
　　儿茶在国外主产于印度、印尼及缅甸；国内主产于云南西双版纳，广西有少量栽培。儿茶主要含有儿茶鞣酸(Catechutannic acid)20％～50％，儿茶素(d－catechin)2％～20％，表儿茶素(epicatechin)，儿茶红(Catechred)，槲皮素，树胶等^[2]。西双版纳傣族称儿茶为“西谢”(傣语)，有悠久的栽种历史。为了更好地开发利用，笔者用反相高效液相色谱法^[3～5]，按选定的色谱条件，对云南西双版纳产区儿茶药材6批市售来源的儿茶膏以及自制的儿茶膏进行了儿茶素含量测定。
　　
　　1仪器与试药
　　
　　岛津LC－20AT(二元泵，无柱温箱，温度主要靠空调调节)；电子分析天平FA2004200g／0．1mg(上海衡平仪器厂)；对照品(+)－CATECHIN98％(SIGMA)；乙腈(HPLC级，美国天地)；甲醇(HPLC级，美国天地)；磷酸(分析纯，国产)；0．45um微孔过滤膜。自制儿茶样品于2005年12月18日采自云南省西双版纳州景洪市景哈哈尼族乡的儿茶树熬制而成，经本所彭朝忠主管技师鉴定为豆科植物儿茶树Acaciacatechu(L．)Willd。6批市售儿茶购于西双版纳。
　　
　　2方法与结果
　　
　　2．1色谱条件　色谱柱：Phenomenex Luna 5uC一18，250mm 4．6ram；流动相：A：0．1％H₃PO₄，B：CAN(85：15)；检测波长：275nm；流速：1．0ml／min；进样量：20ul，梯度洗脱，时间24min。理论板数按儿茶素峰计算大于4000。
　　2．2儿茶膏的提取　儿茶树砍伐后，除去边材，将心材截成段，削切为长约10cm，厚1cm的薄片，放入铝锅(忌用铁锅)，加8倍量的水煎熬7h，当液体由棕红色变成紫黑色时，用纱布过滤，过滤液浓缩至稀薄浆状时，改用文火蒸干，以免碳化。浸膏用竹片搅拌，挑起能拉丝时停火，取出晾干即成儿茶膏。
　　2．3供试品制备　精密称取儿茶膏样品粉末80mg，置于100ml容量瓶内，加50％甲醇约80ml，超声20min，放冷至室温，加50％甲醇至刻度，摇匀即成浓度为800ppm的供试品。取1．5～2．0ml供试品置离心试管内，于12，000转／分钟转速下离心10min，取上清液进样检测。
　　2．4标准曲线制作　(1)精密称取catechin标准品25mg放入50ml容量瓶，加50％甲醇约40ml，超声至全溶。放冷至室温，加50％甲醇至刻度，充分震荡摇匀；(2)倍比稀释，可得一系列对照品溶液：500ppm、250ppm、125ppm、62．5ppm、31．25ppm分别进样检测，以浓度为X轴，以标准样出峰面积积分值为Y轴作图，得一直线。结果表明：儿茶素在O．6126～9．8μg范围内线性良好，回归线方程为Y＝14097X+38106，
　　R²＝0．9999。取同一浓度的样品反复进样检测，儿茶素峰面积积分值的RSD为2．1％；检测的重现性儿茶素保留时间和含量的RSD分别为3．5％、0．9％。对照品与样品色谱图见图1。
　　2．5样品含量检测　按选定的检测方法，对采集来的云南西双版纳产区6批市售来源的儿茶药材儿茶膏以及自制的儿茶膏进行了儿茶素含量测定，其检测结果见图2，表1。
　　
　　注：图谱1B与自制3号样品对应，图2与市售1号样品对应
　　
　　3讨论
　　
　　从表1中可以看出，实验室自制的儿茶膏(高温干燥)的儿茶素含量只有10．08％，而未经高温干燥的儿茶素含量达16．74％，两者含量差异很大，可能是因为儿茶素在高温作用下发生了某些变化，因此，在制作儿茶膏时，要防止高温使儿茶素含量降低。购买的西双版纳的儿茶样品儿茶素含量在14．95～15．84％范围内，其儿茶素平均含量在15．37％左右，有很高的药用价值和经济价值，有待于进一步开发利用。
　　当地傣族民间在熬制儿茶膏的过程中，一是用铁锅煎熬，二是温度控制不好，容易碳化，含量降低，这些都是由于加工不规范所造成的，因此要不断加大对儿茶药材的开发研究，规范化生产。
　　我国儿茶药材资源日益减少，建议加强栽培推广。据文献报道，过去我国西双版纳勐腊、景洪两地的海拔500～600m地区有大面积人工栽培^[1]。近2年经实地调查了解到，因其它热带经济作物的开发而将原来种植的儿茶树砍伐，西双版纳儿茶树的种植面积大为减少。
　　儿茶是《中国药典》中较少收入的提煎膏品种之一，在民间防病治病中应用较广，特别是少数民族地区，远远超出《中国药典》的范畴，是西双版纳特有的民族药，在傣药产业开发中，应充分利用儿茶资源，加强儿茶产品的开发研究，以推动民族医药的发展。
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